L’émergence des arboviroses constitue une menace globale de santé publique compte tenu de la diffusion sur tous les continents des vecteurs et des virus associés à ces infections. La dengue, sélectionnée comme modèle, affecte annuellement plus de 390 millions de personnes dans le monde. Le manque de tests moléculaires rapides et facilement utilisables sur le terrain limite le diagnostic de l’infection et la prise en charge optimale des patients. Dans ce contexte, nous avons développé une nouvelle approche analytique basée sur l’amplification isotherme des génomes viraux couplée à l’agglutination de nanoparticules magnétiques (NPs). Les génomes des virus Dengue (DENV1/2/3/4) sont amplifiés et biotinylés par RT-RPA (Reverse Transcription Recombinase Polymerase Amplification) puis capturés entre des NPs greffées par des sondes nucléiques et des NPs fonctionnalisées par des anticorps anti-biotine. L’application de cycles d’aimantation/relaxation permet d’accélérer cette capture et les agrégats formés sont détectés en 5min par une simple mesure d’absorbance évitant le recours à la fluorescence et à des instruments sophistiqués. Une sensibilité analytique de 10 TCID50/mL a été obtenue sur une gamme de référence (CNR Arboviroses). Sur 31 plasmas humains DENV dépistés préalablement positifs en RT-qPCR (8<Ct<33), 28 ont été détectés par notre approche soit une sensibilité diagnostique de 90,32 % (95 %CI, 79,91 %-100 %). Aucun résultat faux positif n’a été observé sur 30 plasmas négatifs soit une spécificité diagnostique de 100 %. Cette approche innovante s’inscrit pleinement dans le cadre de santé publique actuel visant à améliorer la préparation de la riposte aux infections émergentes (Figure 1).